塑化剂的高效液相色谱HPLC检测方案
 
【塑化剂】
        邻苯二甲酸酯塑化剂是具些许芳香气味或无气味的无色液体，中等黏度、高稳定性、低挥发性、成本低廉、低水溶解度 ,但易溶于多数有机溶剂中。在日常及工业上被广泛使用，以邻苯二甲酸二（2-乙基己基）酯（DEHP）为大宗，占塑化剂产量的四分之三，其次是邻苯二甲酸二丁酯（DBP）。一般为挥发性很低的粘稠液体。有特殊气味，不溶于水，有毒。溶于大多有机溶液由邻苯二甲酸酐与醇在酸(如硫酸)催化剂存在下酯化而成。
 
【作用】
         塑化剂（Plasticizer），或称增塑剂、可塑剂，是一种增加材料的柔软性或使材料液化的添加剂，也是环境雌激素中的酞酸酯类，其添加对象包含了塑胶、混凝土、干壁材料、水泥与石膏等，同一种塑化剂常常使用在不同的对象上，但其效果往往并不相同。塑化剂种类繁多，但使用得普遍的即是一群称为邻苯二甲酸酯类的化合物。据统计2004年全世界的塑化剂市场，总量约在550万吨左右并朝600万吨迈进。2011年5月起台湾食品中先后检出DEHP、DINP、DNOP、DBP、DMP、DEP等6种邻苯二甲酸酯类塑化剂成分，药品中检出DIDP；6月1日卫生部紧急发布公告，将邻苯二甲酸酯类物质，列入食品中可能违法添加的非食用物质和易滥用的食品添加剂名单；截止6月8日，台湾被检测出含塑化剂食品已达961项。
        塑化剂是大宗工业品，广泛应用于国民经济各领域，包括塑料、橡胶、粘合剂、纤维素、树脂、医疗器械、电缆等成千上万种产品中。
        比如一般常使用的保鲜膜，一种是无添加剂的PE(聚乙烯)材料，但其黏性较差；另一种广被使用的是PVC(聚氯乙烯)保鲜膜，有大量的塑化剂，以让PVC（聚氯乙烯）材质变得柔软且增加黏度，非常适合生鲜食品的包装。
    另一个广泛存有塑化剂的产品是PVC制造的儿童玩具，欧盟已经明定塑料玩具中塑化剂的含量需0.1%以下。
 
【样品处理过程】
        样品处理：称取混匀试样1g（精确至0.0001g）于刻度玻璃试管中，加入甲醇定容至10mL，涡旋1min,加入氯化钠2g，剧烈振荡以分散样品，超声提取10min，4000r/min离心10min，上清液过0.45μm有机滤膜，取滤液上机测定。必要时可以用甲醇稀释后进行分析。
 
【色谱条件】
        色谱柱： C18反相色谱柱, 4.6 mm*250 mm，粒度5 µm
        流动相:A相：水/乙腈=60/40  B相：甲醇/乙腈=60/40
        波长：242nm  
        流速：1.0mL/min
        进样量：20µL
        柱温：30℃
 
【胶水样品谱图】
  
【仪器配置】
 

4,4二溴联苯的高效液相色谱HPLC检测方案　
【4,4-二溴联苯】
4,4-二溴联苯系多溴联苯类化合物，多溴联苯（polybrominated biphenyls，简称PBBs），包括四溴代、五溴代、六溴代、八溴代、十溴代等209种同系物，电子电器产品中含有的有毒有害物质可分为卤化物、重金属及其他金属、锌硫化物、放射性物质四类，其中包括铅Pb、汞Hg、镉Cd、六价铬离子CrVI、多氯联苯PCBs、多溴联苯PBBs和多溴联苯醚PBDEs等。多溴联苯和多溴联苯醚都属于溴化阻燃剂(brominated flame retandants,BFRs)，溴化阻燃剂是普遍使用的工业化学制剂,被广泛用于印刷电路板、塑料、涂层、电线电缆及树脂类电子元件中。

【性质】
CAS号: 92-86-4
英文名称: 4,4"-Dibromobiphenyl
中文名称: 4,4"-二溴联苯
CBNumber: CB9392647
分子式: C12H8Br2
分子量: 312

【危害】
多溴联苯也属于持久性有机污染物（POPs）的一种，它在环境中的残留周期长，难分解，不易挥发，易在生物以及人体脂肪中蓄积，对人体的主要危害为影响免疫系统、致癌、损害大脑及神经组织等，光化学降解是环境中多溴联苯的重要归趋之一。

1、仪器与试剂
  1.1仪器、设备
  LC-10Tvp高效液相色谱仪
  Vertex 色谱柱：250mm×4.6mm×5μm
  分析天平
  针头过滤器
  微孔滤膜：0.45µm
  1.2试剂
  甲醇（HPLC）
  磷酸二氢钾（AR）
  磷酸氢二钠（AR）
  纯水

2、供试品溶液的制备
供试品溶液的制备 取该成品，用滤膜过滤，上样分析

3、色谱条件
色谱柱：C18, 4. 6 mmx250 mm，粒度5 µm
流动相：以甲醇为流动相A，以缓冲溶液为流动相B，按下表规定经行梯度洗脱；
波长：226nm
流速：1. 0 mL/min
时间（分钟） 流动相A（%） 流动相B
0 93 7
15 93 7
15.1 100 0
25 100 0
4、测定法
分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10ul，注入液相色谱仪，测定，即得
5、谱图

苯并（a）芘的高效液相色谱HPLC检测方案

【苯并（a）芘】
苯并芘又称苯并（a）芘， 也称3，4-苯并芘，英文缩写BaP，是一种常见的高活性间接致癌物和突变原。它是无色至淡黄色、针状、晶体(纯品)，不溶于水，微溶于乙醇、甲醇，溶于苯、甲苯、二甲苯、氯仿、乙醚、丙酮等，本品在工业上无生产和使用价值，一般只作为生产过程中形成的副产物随废气排放。

【危害】
苯并（a）芘释放到大气中以后，总是和大气中各种类型微粒所形成的气溶胶结合在一起，在8微米以下的可吸入尘粒中，吸入肺部的比率较高，经呼吸道吸入肺部，进入肺泡甚至血液，导致肺癌和心血管疾病。 苯并（a）芘对实验动物的半致癌剂量为80ug，致癌剂量为0.4-10ug，食品中的脂肪在高温热解时或胆固醇受热作用均可生成苯并芘，环境中苯并芘污染主要在加工环节的污染和工业废水、废气的污染，特别是在采用橡胶管道输送原料和成品时，橡胶管道的苯并芘带入食品。包装用蜡纸，矿蜡中苯并芘的含量较高，食品加工机械用的润滑油中的苯并芘含量高，也使食品受到一定量的污染。

【样品处理过程】
粮食、蔬菜、糕点类或水分少的食品：准确称取5.5-10.0g粉碎过筛的样品，置于250ml具塞三角瓶，加入环己烷30ml，超声震荡20min，倾出上清液，残渣两次分别加入环己烷20ml，超声震荡20min。合并3次提取液于100ml分液漏斗中，以环己烷饱和过的二甲基亚砜提取三次，每次10ml，振摇1min，静置10min，合并二甲基亚砜提取液于250ml三角瓶，加水25ml，摇匀；待净化；
植物油、饮料：确称取1.0g的混匀样品，用环己烷40ml分次洗入250ml分液漏斗中，以环己烷饱和过的二甲基亚砜提取三次，每次10ml，振摇1min，静置10min，合并二甲基亚砜提取液于250ml三角瓶，加水25ml，摇匀；待净化；
肉及其制品：准确称取5.5-10.0g切碎混匀的样品，再用无水硫酸钠搅拌（样品与无水硫酸钠的比例为1:1或1:2，如水过多则需在60℃左右先将样品烘干），置于250ml具塞三角瓶，加入环己烷30ml，超声震荡20min，倾出上清液，残渣两次分别加入环己烷20ml，超声震荡20min。合并3次提取液于100ml分液漏斗中，以环己烷饱和过的二甲基亚砜提取三次，每次10ml，振摇1min，静置10min，合并二甲基亚砜提取液于250ml三角瓶，加水25ml，摇匀；待净化；
净化过程略；

【色谱条件】
色谱柱：C18, 4.6 mm*250 mm，粒度5 µm
流动相:ACN:H2O=90:10
激发波长：386nm   发射波长：405nm
流速：1mL/min

【谱图】

【仪器配置】

变压器油中糠醛高效液相色谱HPLC检测方案
-糠醛-
长期以来，采用气相色谱法检测绝缘油中的CO、CO2和低炭烃类含量作为判断电气设备固体绝缘材料老化程度或进行故障分析的依据。但是实验证明，绝缘油氧化分解也能产生绝缘纸老化、降解的特征产物CO和CO2，所以给正确判断带来了难度。
在充油电气设备中，由于构成固体绝缘的纤维质材料的老化导致纤维素的分解而产生几种化合物，如糠醛和呋喃衍生物，呋喃衍生物太部分被吸附在纸上，而小部分溶于油中。这些物质的存在可以作为运行设备固体绝缘老化程度的诊断依据，也可以作为对溶解气体分析的补充。1984年12届国际大电网会议上，英国学者首先提出油中糠醛可作为变压器内绝缘纸老化的特征产物，检测绝缘油中的糠醛含量，可以判断电气体绝缘材料劣化程度。根据中华人民共和国电力行业标准《电力设备预防性试验规程》，当变压器油中的糠醛含量达到4mg/L时，可以认为变压器绝缘老化已经比较严重。测量糠醛时取样简单方便，打开变压器油箱下方阀门即可，无须设备停运。
关于液相色谱法检测变压器油中的糠醛，已有一些相关报道。但是他们所采用的方法耗时较长，不符合电力部门快速检测和应急处理的要求。并且他们采用的是国外进口仪器，价格昂贵。
赛智科技利用全新高性能的LC-10Tvp高效液相色谱仪，经实践检测可提供变压器油中糠醛含量的HPLC检测方案，得出的结果准确可靠，检出限好，适用于变压器油中糠醛含量的测定，仅供广大用户参考。
1、仪器与试剂
1.1仪器、设备
LC-10Tvp高效液相色谱仪；
Vertex 色谱柱 250mm×4.6mm×5μm；
离心机；
5ml移液器；
振荡器。
针头过滤器
微孔滤膜：0.45µm
1.2试剂
甲醇：色谱纯。
糠醛标准物质。
纯水

2、供试品溶液和对照品溶液的制备
对照品溶液的制备 精确量取10uL糠醛，加入1000mL容量瓶中，用甲醇定容至1000mL。该标准储备液的浓度为10μL/L。
供试品溶液的制备 量取5mL变压器油置于10mL离心管中，加入5mL甲醇，用旋涡混合器振荡混合5min后，4000r/min离心10min。取上层甲醇溶液进样检测。

3、色谱条件
色谱柱：RPCN18, 4. 6x250 mm，粒度5 µm
流动相：以甲醇为流动相A，以纯水为流动相B，按下表规定经行梯度洗脱；
波长：280nm
流速：0.8 mL/min

 
4、测定法
分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10ul，注入液相色谱仪，测定，即得
 
5、结果分析
   配制浓度分别为：0.1μL/L，0.5μg/mL，1μL/L，10μL/的糠醛标样溶液，依次进样检测，测得R＝0.9999，线性方程为y=15.62122X+7.17653e-4，在0.1μL/L～10μL/L范围内线性良好。本方法中，参照3倍的信噪比为检出限，可以达到0.05ul/l，符合一般的产品检测要求，同时适合电力部门作为判断电气设备固体绝缘材料老化程度或进行故障分析的依据。

 
图谱
 
 

中华人民共和国农业部公告第1849号公布 《饲料生产企业许可条件》，自2012年12月1日起施行，其中第二十一条明确规定：

（一）除配备常规检验仪器外，还应当配备下列专用检验仪器：

1.固态维生素预混合饲料生产企业配备万分之一分析天平、高效液相色谱仪（配备紫外检测器）、恒温干燥箱、样品粉碎机、标准筛；

2.液态维生素预混合饲料生产企业配备万分之一分析天平、高效液相色谱仪（配备紫外检测器）、酸度计；

3.微量元素预混合饲料生产企业配备万分之一分析天平、原子吸收分光光度计（配备火焰原子化器和被测项目的元素灯）、恒温干燥箱、样品粉碎机、标准筛；

4.复合预混合饲料生产企业配备万分之一分析天平、高效液相色谱仪（配备紫外检测器）、原子吸收分光光度计（配备火焰原子化器和被测项目的元素灯）、恒温干燥箱、高温炉、样品粉碎机、标准筛。

（二）检验化验室应当包括天平室、前处理室、仪器室和留样观察室等功能室，使用面积应当满足仪器、设备、设施布局和检验化验工作需要：

1.天平室有满足分析天平放置要求的天平台；

2.前处理室有能够满足样品前处理和检验要求的通风柜、实验台、器皿柜、试剂柜、气瓶柜或气瓶固定装置以及避光、空调等设备设施；同时开展高温或明火操作和易燃试剂操作的，应当分别设立独立的操作区和通风柜；

3.仪器室满足高效液相色谱仪、原子吸收分光光度计等仪器的使用要求，高效液相色谱仪和原子吸收分光光度计应当分室存放；

4.留样观察室有满足原料和产品贮存要求的样品柜。

【黄曲霉毒素】
黄曲霉毒素是主要由黄曲霉 （aspergillus flavus）寄生曲霉 （a.parasiticus）产生的次生代谢产物，在湿热地区食品和饲料中出现黄曲霉毒素的机率高。B1 、B2和G1、G2，就是经常经常出现在农产品中的黄曲霉毒素的代表，毒性强的排行“B1”，B表示蓝色，因为它在紫外光的照射下会发出蓝色荧光。除了亲兄弟B2之外，它还有堂兄弟G1和G2，因为在紫外光下发射黄绿色荧光而得名。
黄曲霉毒素在农产品中几乎无法避免，不想饿死的人类也只好无奈地吃下一些。世界各国，都只能设定一个“限量标准”。不超过那个标准，危害就小到可以忽略了。它们存在于土壤、动植物、各种坚果中，特别是容易污染花生、玉米、稻米、大豆、小麦等粮油产品，当人摄入量大时，可发生急性中毒，出现急性肝炎、出血性坏死、肝细胞脂肪变性和胆管增生。当微量持续摄入，可造成慢性中毒，生长障碍，引起纤维性病变，致使纤维组织增生。AFT的致癌力也居首位，是目前已知强致癌物之一。
由于黄曲霉毒素在水溶液中会发生荧光淬灭，反相色谱中B1和G1两种异构体荧光强度很弱，需要进行衍生化。衍生化的方法一般有柱前和柱后两类，我国药典在测定黄曲霉毒素时采用碘柱后衍生法。

【样品处理过程】
中药：取供试品粉末15g（过二号筛），精密称定，加入氯化钠3g，置于均质瓶中，精密加入70%甲醇溶液75ml，高速搅拌2min（搅拌速度大于11000r/min），离心5min（离心速度大于2500r/min），精密量取上清液15ml，置50ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜（0.45um）滤过，量取续滤液20ml，待净化；
大米：取样品25g，加入5g氯化钠与125ml提取液（70%甲醇-水溶液）混匀，剧烈振荡20min，用快速定性滤纸过滤，收集滤液；取10ml滤液加入20ml蒸馏水稀释，过滤，收集滤液作为上样液，取15ml该溶液待净化；
植物油：取样品25g，加入125ml提取液（80%乙腈-水溶液）混匀，剧烈振荡20min，用快速定性滤纸过滤，收集滤液；取10ml滤液加入40ml蒸馏水稀释，过滤，收集滤液作为上样液，取25ml该溶液待净化；
净化过程需用到黄曲霉免疫亲和柱，净化过程略。

【色谱条件】
色谱柱：C18, 4.6 mm*250 mm，粒度5 µm
流动相:甲醇-乙腈-水=40:18:42
流动相B:将2.2g一水庚烷磺酸钠与6.8g磷酸二氢钾溶于500ml水中，与500ml甲醇混合，PH=3.5；两相混合梯度脱洗；
波长：λex=360nm     λem=450nm
流速：0.8 mL/min
衍生溶液为0.05%的碘溶液，衍生泵：0.3ml/min, 衍生温度：70℃